阿莫西林高效液相色譜檢測方案
【阿莫西林】
阿莫西林:又名安莫西林或安默西林,是一種最常用的半合成青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素,為 一種白色粉末,半衰期約為 61.3 分鐘。在酸性條件下穩(wěn)定,胃腸道吸收率達(dá) 90%。阿莫西林殺菌作用強(qiáng), 穿透細(xì)胞膜的能力也強(qiáng)。是目前應(yīng)用較為廣泛的口服半合成青霉素之一,其制劑有膠囊、片劑、顆粒劑、 分散片等等,現(xiàn)在常與克拉維酸合用制成分散片。
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【性質(zhì)】
CAS 號:26787-78-0
英文名:AMOXICILLIN
分子式:
C16H19N3O5S·3H2O
分子量:419.46
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【藥理作用】
1、阿莫西林為半合成廣譜青霉素類藥,抗菌譜及抗菌活性與氨芐西林基本相同,但其耐酸性較氨芐西 林強(qiáng),其殺菌作用較后者強(qiáng)而迅速,但不能用于腦膜炎的治療;
2、對大多數(shù)致病的 G+菌和 G-菌(包括球菌和桿菌)均有強(qiáng)大的抑菌和殺菌作用,對肺炎鏈球菌、溶血 性鏈球菌等鏈球菌屬、不產(chǎn)青霉素酶葡萄球菌、糞腸球菌等需氧革蘭陽性球菌,大腸埃希菌、奇異變形菌、 沙門菌屬、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需氧革蘭陰性菌的不產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶菌株及幽門螺桿菌具有良好的抗菌活性。
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藥物及其雜質(zhì)的定量、定性分析是藥物質(zhì)量控制和安全性檢測的必須環(huán)節(jié)。以下是科捷利用LC600A高效液相色譜儀對阿莫西林進(jìn)行的HPLC檢測方案
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【阿莫西林高效液相色譜檢測方案】
1、儀器與試劑
1.1 儀器、設(shè)備
LC-600A 高效液相色譜儀
C18:250mm×4.6mm×5μm
分析天平
容量瓶
超聲波清洗器
PH 計
針式過濾器
微孔濾膜:0.45μm
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1.2 試劑
乙腈(HPLC)
磷酸二氫鉀(AR)
氫氧化鉀(AR)
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2、供試品溶液的制備
供試品溶液的制備:精密稱取供試品約 25mg,置 50ml 容量瓶中,加流動相溶解并定量稀釋至刻度, 搖勻,經(jīng)針式過濾器過濾,即得。
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3、色譜條件
色譜柱:
Vertex C18(250mm×4.6mm×5μm)
流動相:
流動相 A:流動相B=2.5:97.5
配制方法:流動相 A:乙腈
流動相 B:0.05mol/L 磷酸二氫鉀溶液(用 2mol/L 氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié) PH 值為 5.0)
波長:254nm
流速:1. 0 mL/min
進(jìn)樣量:20ul
溫度:室溫
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4、測定法
精密吸取供試品溶液 60ul,注入液相色譜儀,測定,即得
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5、譜圖
【儀器配置】
【主要儀器介紹】
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LC600A高效液相色譜儀
LC600A 高效智能全控液相色譜儀由 P600 高壓恒流泵與 UV600 紫外檢測器直接構(gòu)成等度 / 梯度分析系統(tǒng)。使用 WS600 工作站可以同時控制數(shù)臺 P600 高壓恒流泵、UV600 紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
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性能特點
01、LC-P600 高壓恒流泵
(1)往復(fù)式并聯(lián)泵設(shè)計,流量精度高,壓力脈動小,延長密封圈和
活塞桿的使用壽命;
(2)隔膜式秒沖阻尼器與電子脈動抑制技術(shù)同時控制壓力脈動保障
最低的基線噪音;
(3)整體性單向閥,結(jié)構(gòu)簡單,密封性好;
(4)柱塞桿自動縮進(jìn),方便更換密封圈;
(5)可選配注后清洗功能,適用于使用含緩沖鹽的分析條件。
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02、UV600 紫外檢測器
(1)平行雙錐孔設(shè)計的流動池,大幅提高信噪比,檢測效果更佳;
(2)開機(jī)自檢功能,通過圖譜上 486.6nm 和 656nm 這二點的位置,以判斷波長示值誤差的準(zhǔn)確性,保證極優(yōu)的波長精度,保障儀器最佳狀態(tài);
(3)控制電路采用多微處理器結(jié)構(gòu),分別管理信號采集、數(shù)據(jù)處理、系統(tǒng)控制和通信。在做等度分析時,可以方便的通過全漢字的液晶屏與七個功能鍵,設(shè)置波長、濾波常數(shù)、輸出量程、運行時間等參數(shù)。并且可以實現(xiàn)開關(guān)氘燈,光譜掃描,啟動分析程序等功能;
(4)全數(shù)字交換系統(tǒng),避免了色譜信號需要多重模、數(shù)轉(zhuǎn)換帶來的信號畸變與干擾。
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03、WS600 色譜工作站
(1)具有液相色譜系統(tǒng)控制和色譜數(shù)據(jù)處理雙重功能;
(2)六種定量計算方法;
(3)多重不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)試樣校準(zhǔn)運行,建立樣品濃度 - 面積校正曲線;
(4)靈活的峰識別和處理能力;
(5)色譜圖形、定量計算方式、峰處理參數(shù)及峰鑒定表等可保存到用戶自命名的文件中。
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04、具有自動在線檢測功能